Mise au point d'un test de détection de la mutation L858R du gène du Récepteur de l'EGF par PCR quantitative en temps réel

Rapports de stage | 46 pages | 27-03-2008 | Format : | Note : Non noté

PRIX : 9.00€ |

Résumé

Rapport de stage de recherche en génétique.

Détection d'une mutation du domaine tyrosine kinase ayant un impact sur les traitements du cancer. La présence de cette mutation au sein de la tumeur favorise le traitement aux inhibiteurs de tyrosine kinase avec de 50 à 90 % de rémission totale.

Extrait:

Le cancer bronchique est le cancer le plus meurtrier dans les pays industrialisés. Les stratégies thérapeutiques ciblées visent à inhiber spécifiquement le récepteur du facteur de croissance épithéliale (EGF récepteur ou EGFR) fortement exprimé dans de nombreux cancers. Lors des études cliniques correspondant aux premiers essais d'inhibiteur de l'EGFR, seule une petite fraction de patient a montré un bénéfice thérapeutique. Ces patients étaient presque tous porteurs de mutations affectant un domaine tyrosine kinase de l'EGFR. La détection de cette mutation pourrait donc être un facteur prédictif du bénéfice d'un tel traitement. Les délétions de l'exon19 et la mutation L858R représentent la grande majorité de ces anomalies. La méthode de référence est actuellement le séquençage direct, certes fiable, mais qui présente un manque certain de sensibilité. (...)

Sommaire:

I) Présentation de l'entreprise

A. Historique
B. Description générale de L'IGR
C. La direction de la recherche Clinique et Translationnelle (DRCT)

II) Travail de recherche

A. Introduction
1. Théorie Erreur ! Signet non défini
2. Objectif

B. Matériels et Méthodes
1. Le matériel
2. Méthodes
a. Extraction de l'ADN
b. La PCR 13
c. La PCR quantitative en temps réel
d. Réactifs et protocoles
e. Choix des amorces

C. Résultats
1. Détermination des concentrations optimales en amorces et sonde
2. Comparaison de la spécificité des sondes standards et des sondes MGB
3. Test d'utilisation des sondes en multiplex
4. Détermination de la sensibilité et du seuil de détection
5. Optimisation de la PCR

Synthèse/discussion des résultats

Conclusion
Bibliographie
Annexes

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